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心肌系列:CK-MB的质量法与活性法检测
胶乳免疫比浊法测定CK-MB质量,可以避免其他同工酶的干扰,相比活性检测特异性更高
2023-04-07

       

       肌酸激酶(CK)是人体血液中重要的诊断酶类检测指标之一, 广泛分布于骨骼肌、心肌、胃肠、脑组织等。

       CK为二聚体结构,包括M和B两种亚基,因此有CK-MM、CK-MB、CK-BB三种同工酶。下图为CK在不同组织中各同工酶的分布。

 

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       此外,CK还有线粒体型同工酶。在少数情况下,血清中还有两种巨型CK,即CK与免疫球蛋白的复合物为巨CK1,线粒体CK多聚体为巨CK2。

       在CK同工酶中,CK-MB主要存在于心肌细胞内,具有较好的心肌特异性。在临床应用中,除肌钙蛋白外,CK-MB仍是最主要的心肌损伤标志物。

 

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一、CK-MB生化检测平台的方法学

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       CK-MB是生化检测平台常规检测项目,以往主要的检测方法为免疫抑制法。

       正常情况下,人外周血循环中的CK几乎都是CK-MM同工酶。心肌损伤,如AMI发生后,心肌细胞释放出CK-MB同工酶入血。免疫抑制法的原理是通过抗M亚单位抗体,抑制标本中M亚单位的活性,然后用CK测定试剂来测定B亚单位活性,通过计算得到CK-MB的活性。该方法检测到的结果实际上可能为CK-MB和CK-BB活性,但是,由于血液中CK-BB含量通常非常少,因此可以反映CK-MB的活性。

       当血液中CK-BB水平异常增高或存在巨CK1、巨CK2时,可导致免疫抑制法检测CK-MB结果的异常升高,超过CK-MB的真实活性,甚至出现其结果超过总CK活性的情况。这种情况称为结果倒置现象。正常情况下,人外周血样本中CK-MB活性不大于25U/L, 占CK总活性的3%以下。当CK总活性升高,CK-MB/CK比活性在10%-30%之间时,高度提示有心肌损伤风险。

       近年来,通过免疫法检测CK-MB的质量在临床应用越来越广泛。生化平台的胶乳免疫比浊法通过抗体胶乳颗粒,与CK-MB形成免疫复合物,然后通过比浊法测量CK-MB的含量,研究发现,CK-MB质量法检测结果可以有效避免CK-BB等对结果的影响,如表1。

 

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       当CK-MB/CK≥0.3时,质量法可以有效避免其他同工酶的干扰。当CK-MB≥24U/L且CK-MB /CK<0.3时,大部分患者确诊为AMI,此时活性法与质量法结果一致性较高。

 

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二、CK-MB方法学的选择

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       质量法检测因其更高的特异性,相比活性法更适合临床开展。

       《中华人民共和国卫生行业标准WS/T 462-2015:冠状动脉疾病喝心力衰竭时心脏标志物检测与临床应用》中提出:“CK-MB质量测定具有更优的分析和诊断效用,明显优于活性测定”。

       因此,当有条件时,更推荐使用胶乳免疫比浊法检测CK-MB质量。

 

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三、CK-MB质量结果的临床应用

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       1、心肌梗死的诊断:连续两次CK-MB阳性提示心肌坏死。联合心电图或其他缺血证据可早期诊断心肌梗死。

       2、心肌梗死发生后的生物标志物检测:CK-MB在48-72小时内恢复正常,因此,在72h-2周内可快速鉴别再梗死,是早期检出再梗死的首选标志物。诊断心肌梗死后,间隔6~18h检测三次,对定性评估梗死面积和再梗死等并发症的检出具有价值。

       3、再灌注的非侵入性评估:心肌坏死标志物的上升/下降模式可以辅助再灌注评估;溶栓早期,阻塞动脉的再灌注,血流恢复时标志物从损伤细胞中溢出,继而出现一个早的波峰;治疗后几小时内标志物升高速率提示梗死相关动脉通畅程度。

       4、ACS的预后评估:入院时CK-MB浓度与其30天及6个月后死亡率呈正相关。

 


参考文献:

【1】赵海军, 殷萧彩, 张丽翠. 免疫抑制法检测肌酸激酶与肌酸激酶同工酶结果倒置的原因及临床价值[J]. 农垦医学, 2022, 44(1):4.

【2】田倩, 李环, 张越,等. 血清心肌型肌酸激酶同工酶活性大于肌酸激酶的病例分析[J]. 国际检验医学杂志, 2022, 43(14):4.

【3】沈世恩, 张洪瑞. 肌酸激酶同工酶质量法在心肌梗死辅助诊断中的性能评价[J]. 心脑血管病防治, 2022(004):022.

【4】Alexander J H , Sparapani R A ,  Mahaffey K W , et al. Association Between Minor Elevations of Creatine Kinase-MB Level and Mortality in Patients With Acute Coronary Syndromes Without ST-Segment Elevation[J]. Jama, 2000, 283(3):347-353.

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